教育房产时事环球科技商业
投稿投诉
商业财经
热点动态
科技数码
软件应用
国际环球
晨报科学
新闻时事
信息智能
汽车房产
办公手机
教育体育
生活生物

pbs缓冲液配制(dpbs和pbs的区别)

  pbs缓冲液配制(dpbs和pbs的区别)
  做实验离不开各种各样的溶液,实验台上那些琳琅满目的瓶瓶罐罐基本上都是每一个实验人员亲手配置出来的。
  这些不同名目的溶液的正确配制是您实验成功的基础,一旦某一种溶液出现问题,不仅导致整个实验失败,甚至有时候往往查不出原因而无所适从。
  今天,我们就来唠一唠缓冲溶液相关的知识,了解一下实验室常见缓冲液的配比方法。
  实验室各种缓冲溶液
  首先,我们了解一下什么是缓冲溶液?缓冲液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共轭碱」或「弱碱及其共轭酸」缓冲对所组成的溶液,能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中最常用的一种缓冲液PBS为例,是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对,在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。
  缓冲原理
  假设缓冲溶液里含有弱酸HA以及它的共轭碱 A¯ 。在溶液里发生的质子反应为:
  水合氢离子的浓度取决于弱酸与其共轭碱的浓度比。当加入少量强碱时,酸被中和,导致了氢氧根离子在溶液中很少累积,从而C(A¯)的浓度增加,C(HA)的浓度减少。
  可以看到,虽然加入了强碱,但是溶液里的氢氧根离子变化很少,同时,C(A¯)C(HA)浓度较大,相对的变化小,两者比值几乎无变化,因此根据公式,水合氢离子的浓度变化很小。加入弱酸则是同样的道理。由于在C(A¯)C(HA)大浓度基数上的微小变化不会改变比值,也因此维持了体系内氢离子和氢氧根离子浓度的平衡。
  缓冲溶液的选择与计算
  为了保证缓冲溶液有足够强的缓冲能力,在配制缓冲溶液时,需要做到:
  为使共轭酸碱对的浓度比接近于1,应根据所需要维持的pH范围选择合适的缓冲对,使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH。
  例如,生物培养液中需用PH=7.0的缓冲溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以选择的合适的缓冲对。如若配制PH=9.0的缓冲溶液,则可选择NH3·H2O-NH4Cl缓冲对(pKa(NH4+)=9.25)。可见弱酸的Ka是选择缓冲溶液的主要依据,表中列出了几种常用的缓冲溶液。
  缓冲溶液的作用
  缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围,例如,苯酚在碱性介质及铁氰化钾存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时最为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲溶液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。
  在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,作用也就失去了,缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。
  使用中的注意事项
  使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加试剂,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。
  提到缓冲液就不得不延伸一下,这就是Henderson-Hasselbalch方程。
  在前面提到,
  将等式同时取对数,并简化就可以得到:
  或者
  这就是Henderson-Hasselbalch方程。
  注意:式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,一般都可用此式计算。
  常见组成
  常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。常见的缓冲体系有:
  1、弱酸和它的盐(如HAc---NaAc)
  2、弱碱和它的盐(NH3·H2O---NH4Cl)
  3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液组成。
  而生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
  硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。
  柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。
  磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
  三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。
  常见的几种缓冲液配比方法
  Trizma base 和Trizma HCl (Sigma 的Tris配比方法) 混合配1 L 50 mM Tris 缓冲液
  1L 1M磷酸钠缓冲液(pH6.0-7.2)配比表(25°C)
  1 L 100 mM 磷酸钠缓冲液(pH5.8-8.0)配比表(25°C)
  50 mM Glycine-HCl 缓冲液
  准备200 mM glycine溶液(A),200 mM HCl (B);50 mL (A) + X mL (B),稀释到200 mL。
  pH范围表如下所示
  50 mM Glycine-NaOH缓冲液
  准备200 mM glycine溶液 (A),200 mM NaOH (B);50 mL (A) + X mL (B),稀释到200 mL。
  pH范围表如下所示
  50 mM 乙酸根缓冲液 (Acetate Buffer)
  准备200 mM 乙酸溶液 (A),200 mM乙酸钠溶液 (B);X mL (A) + Y mL (B), 稀释到100 mL。
  pH范围如下所示
  50 mM 柠檬酸盐缓冲液 (Citrate Buffer)
  准备100 mM柠檬酸溶液(A),100 mM柠檬酸钠溶液(B);X mL (A) + Y mL (B),稀释到100 mL。
  pH范围如下表所示
  50 mM 碳酸根缓冲液 (Carbonic acid buffer)
  准备200 mM Na2CO3 (A) 和 200 mM NaHCO3 (B) ;X mL (A) + Y mL (B), 稀释到200 mL。
  pH范围表如下所示
  PBS
  调节pH到需求的值,使用蒸锅或过滤膜进行杀菌。
  当然了,要说缓冲液种类,肯定不是只有这八种,局长只是在这里简单举例了这八种,最后附上一张各种缓冲液适用的pH范围,看看你需要用的缓冲液在不在这里面~~

物理知识科普电势高低的判断口诀关于到现在电势高低的判断口诀这个话题,相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧,因为这个话题也是近期非常火热的,那么既然现在大家都想要知道电势高低的判断口诀,小编也是到网上收集了一些与物理知识科普电势的公式关于到现在电势的公式这个话题,相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧,因为这个话题也是近期非常火热的,那么既然现在大家都想要知道电势的公式,小编也是到网上收集了一些与电势的公式相关的科普下电压互感器的作用是什么关于到现在电压互感器的作用是什么这个话题,相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧,因为这个话题也是近期非常火热的,那么既然现在大家都想要知道电压互感器的作用是什么,小编也是到网上收集科普下并联电压处处相等吗并联和串联的区别关于到现在并联电压处处相等吗并联和串联的区别这个话题,相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧,因为这个话题也是近期非常火热的,那么既然现在大家都想要知道并联电压处处相等吗并联和串联的科普下电压表必须与被测电路什么联关于到现在电压表必须与被测电路什么联这个话题,相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧,因为这个话题也是近期非常火热的,那么既然现在大家都想要知道电压表必须与被测电路什么联,小编也是到科普下碘是什么碘伏有哪些作用关于到现在碘是什么碘伏有哪些作用这个话题,相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧,因为这个话题也是近期非常火热的,那么既然现在大家都想要知道碘是什么碘伏有哪些作用,小编也是到网上收集碘伏是碘酒吗(关于碘伏和碘酒)碘伏是碘酒吗(关于碘伏和碘酒)日常生活中发生割伤擦伤等小的外伤,该如何处理?最谨慎的答案是去医院。但有时候伤得确实不重,为此到医院排队挂号划价缴费消毒处理,实在麻烦。所以很多人会自碘伏是碘酒吗(碘酊与碘伏的区别)碘伏是碘酒吗(碘酊与碘伏的区别)月上旬,全国各地小朋友开始陆陆续续的进入暑假阶段!放飞自我的同时,难免会有跌打损伤!在皮肤出现一些轻微创伤的时候,很多人都会选择使用消毒水进行消毒,生铁和熟铁的区别(铁锅熟铁和生铁有什么区别)生铁和熟铁的区别(铁锅熟铁和生铁有什么区别)生活中我们往往听到生铁和熟铁的概念,有时候你会不会感觉很奇怪,铁还分生熟,下面我来简单介绍下生铁和熟铁的概念!生铁生铁是碳的质量分数大于科普下while引导什么从句while做名词与连词关于到现在while引导什么从句while做名词与连词这个话题,相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧,因为这个话题也是近期非常火热的,那么既然现在大家都想要知道while引导什么从农历二十四节气(二十四节气有哪些)农历二十四节气(二十四节气有哪些)今天是2021年8月7日,农历辛丑年六月二十九日,中国传统二十四节气立秋。窗外阴沉沉,消逝了往日的夏热,增添了些许凉意。不知由来,一股愁思涌上心头
李世民墓(李世民碰过武则天吗)李世民墓(李世民碰过武则天吗)劲草,板荡识诚臣。勇夫安识义,智者必怀仁。很多人一直问西安为什么修地铁修了那么长时间?这不是不发展,动不动就挖到了古墓,你说这可怎么办?名义上是十三朝唐玄宗是谁(唐玄宗是李世民什么人)唐玄宗是谁(唐玄宗是李世民什么人)唐玄宗李隆基是唐朝在位时间最长的皇帝,他发动政变,诛杀韦后,助其父登上帝位,使朝政大权重回李家人的手中。接下来,让我们一起去看一下唐玄宗李隆基的简隋炀帝的女儿(李世民哪个女儿最有名)隋炀帝的女儿(李世民哪个女儿最有名)581年,北周静帝禅让帝位于杨坚,北周覆亡。杨坚定国号为隋,定都大兴城。随后于589年南下灭陈朝,统一中国,结束了自西晋末年以来长达近300年的陈涉世家词类活用(陈涉世家古今异义词类活用)陈涉世家词类活用(陈涉世家古今异义词类活用)陈胜吴广率领区区数百人,斩木为兵,揭竿为旗,却能挑战兵多将广武备精良的秦朝,揭开秦末农民大起义的序幕。是因为一句王侯将相宁有种乎!吼出了陈涉世家词类活用(陈涉起义词类活用)陈涉世家词类活用(陈涉起义词类活用)其实有时候做文言文翻译,可能我们自己本身都不知道这里考察的是什么规则,只是凭着直觉去作答,当然这也算是一种能力,只不过若是我们能够掌握住那些翻译陈涉世家通假字(陈涉世家一词多义整理)陈涉世家通假字(陈涉世家一词多义整理)32201海里辰星初中语文基础知识二常用通假字通假字本字本意例句出处不否尊君在不?陈太丘与友期行说悦愉快有朋自远方来,不亦说乎?论语十二章有又知识醉翁亭记古今异义一词多义词类活用关于到现在醉翁亭记古今异义一词多义词类活用这个话题相信很多小伙伴都是非常有兴趣了解的吧因为这个话题也是近期非常火热的那么既然现在大家都想要知道醉翁亭记古今异义一词多义词类活用小编也送东阳马生序通假字(送东阳马生序古今异义词)送东阳马生序通假字(送东阳马生序古今异义词)余幼时即嗜学。家贫,无从致书以观,每假借于藏书之家,手自笔录,计日以还。天大寒,砚冰坚,手指不可屈伸,弗之怠。录毕,走送之,不敢稍逾约。李世民的墓(李世民陵墓为何那么寒碜)李世民的墓(李世民陵墓为何那么寒碜)649年7月10日,唐太宗李世民因病驾崩于终南山上的翠微宫含风殿。享年52岁。李世民的一生,是无比辉煌的一生。他17岁投身军伍,去雁门关营救被突诸葛亮是怎么死的(诸葛亮的墓为什么没人敢盗)诸葛亮是怎么死的(诸葛亮的墓为什么没人敢盗)202107201537桥鉴古今诸葛亮,在最后一次北伐,病逝于五丈原,光复中原中兴汉室的愿望,终成梦幻,可惜,可叹!诸葛亮病逝于五丈原诸腿酸怎么办(腿部酸痛是什么原因引起的)腿酸怎么办(腿部酸痛是什么原因引起的)怀孕期间有各种各样的苦恼,有的是孕吐有的是腿疼,还有一些就是身体肿胀。自从怀孕以来,一直有很多无法解释的腿部疼痛,有时在膝盖,有时在小腿,有时