过氧化氢酶活性测定（过氧化氢酶活性测定方法） 原理：淀粉遇碘后，形成蓝色的复合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖，麦芽糖遇碘后，不形成蓝色的复合物。 1、材料：新配置的淀粉酶溶液，新鲜肝脏研磨液，可溶性淀粉溶液，过氧化氢溶液等。 2、步骤： (1)探究温度对酶活性的影响 温度对酶活性的影响 在温度对酶活性的影响的实验中，三支试管的条件，除温度外均相同。3号试管处在60℃的温度条件下，酶活性最大，试管中的淀粉被分解，滴入碘液后不会变蓝。2号试管的温度条件是100℃， 这样高温度条件下，淀粉酶已失去活性，1号试管的温度条件是O℃，低温抑制淀粉酶的活性。所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解，滴上碘液后都会变蓝，此实验可以证明;酶的催化作用需要适宜的温度条件，温度过高和过低都将影响酶的活性。 (2)探究pH对酶活性的影响 实验1过氧化氢(H2O2)在过氧化氢酶的催化作用下，可以分解成水和氧气，可以放入带火星的木条，看能否复燃来检测是否有氧气产生。 步骤项目试管1试管2试管3 1加入过氧化氢溶液2mL2mL2mL 2加入蒸馏水1mL—— 3加入盐酸溶液—1mL— 4加入NaOH溶液——1mL 5滴加肝脏研磨液2滴2滴2滴 637℃水浴5min5min5min 7检 验放入带火星的木条复燃不复燃不复燃 试管内气泡产生量有气泡产生没有气泡产生没有气泡产生 2号试管内加入了盐酸，溶液的pH较低，3号试管内加入了氢氧化钠，溶液的pH较高，在过低或过高pH环境中，过氧化氢酶失去活性，不能使过氧化氢分解，没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱，溶液近似中性，过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气，使木条复燃。 实验2 原理：淀粉在淀粉酶的作用下，被分解成麦芽糖，麦芽糖能与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色沉淀 步骤项目试管1试管2试管3 1加入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL 2加入蒸馏水1mL—— 3加入盐酸溶液—1mL— 4加入NaOH溶液——1mL 5加入新配置的淀粉酶溶液2滴2滴2滴 660℃水浴5min5min5min 7加入斐林试剂2mL2mL2mL 850℃-60℃水浴2min2min2min 9观察结果有砖红色沉淀无无 实验现象记录如下：1号试管有砖红色沉淀生成，2号试管无砖红色沉淀生成，3号试管无砖红色沉淀生成。 2号试管内加入了盐酸，溶液的pH较低，3号试管内加入了氢氧化钠，溶液的pH较高，在这样的pH环境中，淀粉酶失去活性，不能使淀粉分解，所以试管中加人斐林试剂后并无砖红色沉淀生成。1号试管内没有加入酸或碱，溶液近似中性，这样的pH适于淀粉酶发挥催化作用，所以淀粉被分解并与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀。以上实验可以证明，酶的催化作用需要适宜的pH，pH偏低或偏高都能影响酶的活性 例、①酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。 ②底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎：成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著;当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。=。 ③pH对酶促反应的影响：每一种酶只能在一定限度的pH范围内才表现活性，超过这个范围酶就会失去活性。其特点中曲线变化。在一定条件下，每一种酶在某一定PH时活力最大，这个pH称为这种酶的最适pH。 ④温度对酶促反应的影响：酶促反应在一定温度范围内反应速度随温度的升高而加快;但当温度升高到一定限度时，酶促反应速度不仅不再加快反而随着温度的升高而下降。在一定条件下，每一种酶在某一定温度时活力最大，这个温度称为这种酶的最适温度。
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