石蜡包埋（石蜡切片免疫组化） 1、组织的采集、固定和保存： 采取组织后， 方法一：4%多聚甲醛（4%PFA）4°C 固定1小时（根据组织大小和致密程度调整固定时间）或过夜 方法二：采用bouin’s固定RT 2h（6-8d tesis）or RT 过夜（成年 tesis） PBS缓冲液洗三次，每次5min，4°C保存于70%乙醇中。 2、组织的包埋、切片、展片及保存：： 固定后的样品经梯度乙醇脱水、二甲苯透明，52-54°C石蜡包埋，常规切片，切片厚4 -10mm，贴于处理过的干净载玻片上，37°C烤片过夜，之后收集于载片盒中，RT密封保存。 石蜡包埋： 保存于4°C 70%乙醇中的组织样品 ¯ 80%乙醇 15 min ¯ 95%乙醇 15 min ¯ 100%乙醇 15min ´ 2 ¯ 1/2乙醇1/2二甲苯 15 min ¯ 二甲苯透明 5-10 min ¯ 1/2二甲苯1/2石蜡 30 min ¯ 石蜡（1） 1.5hr ¯ 石蜡（2） 1.5-2.5hr ¯ 石蜡（3） 包埋 ¯ RT保存 3、石蜡组织切片的免疫组化方法： 密封保存于RT的组织切片 ¯ 二甲苯(1) 20 min ¯ 二甲苯(2) 20 min ¯ 100%乙醇 20min ¯ 95%乙醇 10 min ¯ 80%乙醇 10 min ¯ 通风橱晾干，阻水笔在组织周围画圈 ¯ 切片在PBS中浸泡 5 min*2 ¯ 0.4%Tritonx RT 10 min ¯ 切片在PBS中浸泡 5 min*3 3%H2O2 RT10min 切片在PBS中浸泡 5 min*3 0.25%胰酶RT10min 切片在PBS中浸泡 5 min*3 Blocking buffer(3%BSA+5%NGS+0.2%Tritonx-100 in PBS)RT 60min 倾去blocking buffer，勿洗 一抗4°C overnight in blocking buffer 取出切片复温1h，切片在PBS中浸泡 5 min*3 二抗in blocking buffer GAR1：200 （GAM1：100），RT 1h 切片在PBS中浸泡 5 min*3 DAB显色5-10min（50微升A+50微升B+900微升PBS+5微升3%H2O2） 如果是增强型DAB只要1min即可。 切片浸入PBS终止显色，HE衬染1s， 玻片架放入泡沫盒，流水冲洗15min，肉眼看到淡淡的紫色即可停止。 若颜色太深，可用0.1-0.5%盐酸乙醇分色1～2秒钟（或更久） 脱水85%乙醇 5 min ¯ 95%乙醇 5 min ¯ 无水乙醇 5 min ¯ 无水乙醇 5min ¯ 二甲苯(1) 10min ¯ 二甲苯(2) 10min ¯ 中性树胶封片，室温干燥保存 4、石蜡组织切片的免疫荧光方法： 密封保存于RT的组织切片 ¯ 二甲苯(1) 20 min ¯ 二甲苯(2) 20 min ¯ 100%乙醇 20min ¯ 95%乙醇 10 min ¯ 80%乙醇 10 min ¯ 通风橱晾干，阻水笔在组织周围画圈 ¯ 切片在PBS中浸泡 5 min*2 ¯ 0.4%Tritonx RT 10 min ¯ 切片在PBS中浸泡 5 min*3 切片在PBS中浸泡 5 min*3 0.25%胰酶RT10min 切片在PBS中浸泡 5 min*3 Blocking buffer(3%BSA+5%NGS+0.2%Tritonx-100 in PBS)RT 60min 倾去blocking buffer，勿洗 一抗4°C overnight in blocking buffer 取出切片复温1h，切片在PBS中浸泡 5 min*3 荧光二抗in blocking buffer GAR-cy3 1：1000，GAM-488 1：1000RT 1h DAPI（1：1000请根据二抗说明稀释二抗） 切片在PBS中浸泡 5 min*3
幼升小入学准备（幼升小要做好哪些准备）幼升小入学准备（幼升小要做好哪些准备）感觉就在不久前，我们手把手教大家入园要做什么样的准备，比如安抚物不能少，冰棒棍早点备起来，一转眼，不少亲都在后台留言说九月份孩子就要上小学了！免费发短信的软件（免费短信发送平台有哪些？）免费发短信的软件（免费短信发送平台有哪些？）很多商家都会有这样的疑问免费短信发送平台有哪些呢？对于这个问题小编就为大家解惑一些，其实短信平台都是免费使用的，而一般群发短信只需要几分淘宝开店流程（淘宝开）淘宝开店流程（淘宝开）一注册账号首先第一步肯定就是注册淘宝账号了，在这里呢按照注册的基本操作相信大家都能完成，但是，旺旺名是不可以修改的，确定好做什么类目之后，旺旺名最好是能与店铺淘宝开店（新手小白怎么开淘宝店）淘宝开店（新手小白怎么开淘宝店）有人认为淘宝行业已经不如以往，运营淘宝店也越来越艰辛。曾经运营淘宝店投入很少，经营时间地点灵活，消费群体潜力大潜在顾客覆盖广。而当下某种意义上确实如吃什么降血压（健康平常吃什么降血压好）吃什么降血压（健康平常吃什么降血压好）饮食对于高血压非常重要，很多人就是由于饮食不注意而引起了高血压，现在人们饮食高，热量比较油腻，高血压人群已经有逐年上升趋势，怎样控制高血压已迫吃什么降血压（健康平常吃什么降血压好）吃什么降血压（健康平常吃什么降血压好）高血压是指患者在不同的三天测量血压，收缩压140mmHg或者舒张压90mmHg，或者两者均高于以上数值，就可诊断为高血压。高血压的危害高血压会血糖高的人吃什么能把血糖降下来呢（那些食物降血糖）血糖高的人吃什么能把血糖降下来呢（那些食物降血糖）第一番茄，番茄十分适合糖尿病患者食用，番茄富含铁元素维生素c维生素e等等，可以帮助糖尿病患者控制血糖，还能提高高密度脂蛋白。第二菠血糖高的人吃什么能把血糖降下来呢（那些食物降血糖）血糖高的人吃什么能把血糖降下来呢（那些食物降血糖）饮食与血糖二者之间的关系是相辅相成的，如果在饮食方面采取科学的方法，多食用一些，对血糖有益处的食物，就能够帮助大家控制血糖，那么也血脂高怎么调理才会降（如何控制高血脂）血脂高怎么调理才会降（如何控制高血脂）高血脂主要是因为进食高脂肪，或者是体内的一些酶代谢异常引起。我们的控制主要是通过以下几个方面第一，控制体重，使体重达到标准体重，血脂可以降低。wink是什么意思（网络流行语wink什么意思中文翻译）wink是什么意思（网络流行语wink什么意思中文翻译）有很多网络流行语里夹杂了一些让人一知半解的英文单词。而在不少综艺节目影视剧里，我们都能听到这样一个英文单词wink。在社交软wink是什么意思（网络流行语wink什么意思中文翻译）wink是什么意思（网络流行语wink什么意思中文翻译）最近朋友圈里有经常看到一个词那就是wink，英语四级都没过的小编默默的百度了一下，wink的中文意思是使眼色递眼色等。突然想